Введение 
Основным материалом для создания данного руководства становится информация наиболее авторитетных организаций по борьбе с паразитарными заболеваниями животных, в первую очередь — рекомендации Американского и Европейского обществ по борьбе с дирофиляриозом, материалы европейских и американских конгрессов, посвящённых дирофиляриозу, результаты завершённых исследований, статьи ведущих экспертов, в какой-то мере, мнение ряда авторитетных практикующих ветеринарных врачей и опыт нашей клиники.

Аспекты морфологии и биологии паразитов
Дирофиляриоз (Dirofilariasis, от лат. «diro, filum» — «злая нить») — гельминтозное заболевание, вызываемое нематодами рода Dirofilaria. Длина взрослых особей достигает 40см, диаметр до 1,3мм. Обычный дефинитивный хозяин для  дирофилярий — домашние собаки и другие представители семейства  собачьих. Промежуточный хозяин — комары (роды Aedes, Culex, Anopheles). Общее количество гельминтов, заражающих собаку,  варьирует от 1 до 250 особей. Помимо собак заражению могут быть подвержены и другие виды: волки, лисы, койоты, домашние и дикие кошки, хорьки, ондатры, морские львы,  носухи, а также  люди.

В Украине и России регистрируют две разновидности дирофилярий:

— D.Immitis — имаго этого вида паразитируют в легочных  артериях и правых отделах сердца,вызывая сердечно-легочную форму заболевания;
— D.Repens — взрослые особи этого вида паразитируют в подкожной клетчатке и мышцах, вызывая кожную форму болезни.

Взрослые самки дирофилярий ежедневно выделяют большое количество личинок микроскопического размера. Это личинки первой стадии, их ещё называют «личинки стадии L1″ или «микрофилярии». Током крови микрофилярии разносятся по всей кровеносной системе собаки. Комар пьёт кровь у заражённого животного, заглатывая вместе с кровью личинок первой стадии. В организме комара личинки развиваются, проходят стадии развития L2 и L3. Время развития личинок в комаре, до инвазионной стадии L3, в среднем занимает 10-14 дней, но может варьировать, в зависимости от средней дневной температуры воздуха и влажности. Во время укуса комара инвазионные личинки проникают в организм дефинитивного хозяина. После инокуляции 2-3 месяца они находятся в подкожной клетчатке и мышцах, за это время два раза линяют, проходят стадии развития L4 и L5. Стадия L5  — незрелые взрослые особи гельминтов, могут достигать длины 1-2см. Юные особи D.Repens остаются паразитировать в пределах подкожной клетчатки. Особи D.Immitis мигрируют в системный кровоток, и, током крови, заносятся в легочные артерии. Как правило, через 7-9 месяцев после начала инвазии в крови циркулируют микрофилярии. Продолжительность жизни гельминтов в организме собаки может достигать 7 лет от момента заражения.  Юные и взрослые D.Immitis локализуются  преимущественно  в каудальных легочных артериях, иногда мигрируя в главные легочные артерии, при тяжёлой инвазии — в правые отделы сердца и крупные вены.

Сердечно-лёгочная форма дирофиляриоза 

Патогенез
Тяжесть поражения и, соответственно, клинические проявления болезни зависят, главным образом, от количества паразитов в одной собаке, продолжительности инвазии и взаимодействия организма хозяина и паразитов. Во всех случаях заражения в легочных артериях развиваются:
— ворсинчатая миоинтимальная пролиферация,
— воспаление,
— легочная гипертензия,
— нарушение целостности сосудов,
— фиброз.

Возможные осложнения течения болезни
Очень значительная, или даже бо́льшая часть  патологических и клинических изменений связана с гибелью паразитов. После естественной гибели, или как следствие лечения, дирофилярии разлагаются на маленькие фрагменты и смещаются в дистальные легочные артерии. Эти фрагменты паразитов, наряду с выраженным воспалением, скоплением тромбоцитов, приводят к тромбоэмболии легочных артерий (гельминт-индуцированная ТЭЛА).  Уже как следствие легочной гипертензии у части пациентов развивается “хроническое легочное сердце” (cor-pulmonale), появляются симптомы правожелудочковой застойной сердечной недостаточности. В среднем, у 14% больных собак  развивается поражение  легочной  паренхимы, связанное  с эозинофильным пневмонитом (ЭП). Эозинофильная  гранулёма  лёгкого (ЭГЛ) — относительно  редкое осложнение дирофиляриоза. У большей  части заражённых животных развивается гломерулонефрит, он проявляется протеинурией, и редко становится причиной почечной  недостаточности. Абсолютно все дирофилярии, как и многие другие филяриозные нематоды, несут в себе бактерии-эндосимбионты — вольбахии.  Вольбахии — это облигатные бактерии, от которых зависят плодовитость и выживаемость дирофилярий. Гломерулонефрит и ЭП вызывают не взрослые дирофилярии, а  как раз вольбахии вместе с микрофиляриями. Одно из возможных осложнений заболевания — нетипичная миграция паразитов (головной и спинной мозг, глаза, подкожная клетчатка, брюшная полость).

У небольшой части собак с тяжёлой инвазией остро развивается «синдром полой вены», обусловленный дирофиляриозом (Heartworm Caval Syndrome). Бо́льшая часть дирофилярий  при этом  расположена в правом предсердии и полых венах. Возникает частичная обструкция кровотока  через правые отделы сердца, трикуспидальная недостаточность. Синдрому полой вены всегда предшествует гельминт-индуцированная ТЭЛА, что значительно  увеличивает негативные эффекты трикуспидальной регургитации. Снижается преднагрузка на левый желудочек и сердечный выброс, нередко развиваются аритмии. Всегда присутствует гемолитическая анемия, метаболический ацидоз, гепаторенальная дисфункция, развивается ДВС-синдром. Без хирургического удаления большей части гельминтов такие животные обычно погибают в течение 48 часов от кардиогенного (обструктивного) шока.

Подход к диагностике

В постановке диагноза имеют значение:
— проживание животного в эндемичной зоне, или её посещение во время лёта комаров;
— в регионах, где есть сезонность лёта комаров, наибольшее количество больных выявляется в тёплое время года;
—  у большинства заражённых животных симптомы отсутствуют, они могут оставаться асимптоматичными в течение месяцев и даже лет.

Клинические проявления дирофиляриоза вариабельны. Симптомы обычно хронические, постепенно нарастающие. Первыми признаками болезни, которые замечают владельцы, наиболее часто становятся быстрая утомляемость и кашель. Очень характерны потеря веса и одышка, могут встречаться обмороки, при развитии правожелудочковой сердечной недостаточности – асцит, гидроторакс, отёки. На фоне хронического течения болезни, вследствие естественной гибели большого количества гельминтов, может развиваться симптоматика тромбоэмболии лёгочных артерий: остро развивающаяся дыхательная недостаточность, лихорадка, кровохарканье.

У 13% собак, имеющих симптомы болезни, аускультируется систолический шум  в пункте оптима трикуспидального клапана, такая же частота встречаемости расщепления второго тона. Очень характерен цианоз слизистых оболочек, у пациентов с тяжёлой инвазией может выявляться выраженная бледность слизистых, замедление СНК, влажные хрипы, гепатоспленомегалия, пульсация ярёмных вен.

Внезапная смерть при дирофиляриозе собак не характерна — как правило, смерти предшествуют тяжёлые дыхательные нарушения или кахексия.

Основные, и наиболее ценные диагностические исследования — тестирование на антиген, тестирование на микрофилярии, рентгенография грудной клетки и эхокардиография (ЭХО). Сопоставление результатов этих исследований необходимы для:
— установления диагноза
— дифференциальной диагностики
— оценки тяжести инвазии и степени сердечно-легочных нарушений
— определения лечебной тактики и прогноза
— оценки эффективности проведенной терапии

Лабораторная диагностика

Иммунодиагностические тесты

Одноразовые тест-системы для экспресс-диагностики — это главный диагностический инструмент, они же являются основным инструментом скрининга. Существуют тест-системы основанные на технологии ELISA и иммунохроматографии, диагностическая ценность у них примерно одинаковая. В клинической практике полезны тест-системы обоих форматов.

Тесты обнаруживают протеин (антиген), секретируемый, преимущественно, взрослыми самками D.Immitis. У небольшого числа собак с инвазией наличие антигена в крови может определяться через 5 месяцев от момента заражения, но у большинства заражённых животных антигенемия определяется через 6-7 месяцев после заражения. В такой ситуации, когда заражённая собака получает препараты для профилактики дирофиляриоза (см. раздел «Профилактика»), антигенемия может определяться ещё позже — через 9 месяцев от момента заражения.

From Atkins CE: Comparison of results of three commercial heartworm antigen tests in dogs with low heartworm burdens. J Am Vet Med Assoc 222:1221, 2003

Современные тест-системы обладают специфичностью близкой к 100%. В отношении чувствительности авторы обычно опираются на результаты исследований, опубликованные в 2003г: при наличии одной взрослой самки чувствительность тестов относительно невысокая — 64%, при наличии четырёх взрослых самок — 89%, при большем количестве самок, чувствительность тест-систем возрастает.

Возможные причины ложноотрицательного результата тестирования на антиген:
— инвазия с малым количеством самок
— молодая инвазия (тестирование проводят не ранее 7-ми мес возраста собаки)
— задержка антигенемии у собак, получающих препараты для профилактики
— инвазия только самцами
— нарушение инструкции производителя
— наличие комплексов антиген/антитело

Термообработка сыворотки перед тестом на антиген
На сегодняшний день есть задокументированные случаи, когда антиген, связанный иммунными комплексами не определялся тест-системами. Локальные данные по некоторым регионам США: от 5 до 10% тестов оказываются ложноотрицательными. Одна из основных причин ложноотрицательных результатов тестирования – наличие комплексов антиген/антитело. Если перед проведением теста провести термическую обработку сыворотки (103⁰ С, в течение 10мин), комплексы антиген/антитело разрушаются и высвобождается антиген, таким образом снижается вероятность ложноотрицательного результата тестирования. Однако на сегодняшний день рутинная термообработка сыворотки не рекомендована, т.к. это является нарушением инструкции производителей тестов.

Тестирование на микрофилярии
Независимо от результатов серологического тестирования, обязательно необходимо выполнить тест на микрофилярии. Положительный результат теста можно использовать для подтверждения диагноза. Наличие личинок первой стадии идентифицирует пациента как источник инвазии и готовит врача к потенциально возможной серьёзной реакции на уничтожение микрофилярий. Среди различных вариантов исследования в Украине и России наибольшей популярностью пользуются нативный мазок крови и модифицированный метод Кнотта. “Минусы” теста:
— в течение первых 7 месяцев от начала инвазии результаты тестов будут негативными (тестирование не ранее 7-ми месячного возраста животного);
— в среднем 30% собак  амикрофиляриемичны (это может быть связано с рядом факторов: молодая инвазия, инвазия однополыми особями, иммуно-обусловленная  деструкция микрофилярий, лекарственно-индуцированная деструкция микрофилярий);
— количество микрофилярий не коррелирует с  числом  взрослых особей.

Если ваша диагностика началась с того, что вы обнаружили микрофилярии в крови у собаки — необходимо провести тестирование на антиген, рентгенографию грудной клетки и эхокардиографию. Как уже упоминалось ранее, экспресс-тесты обладают высокой специфичностью, положительный результат исследования однозначно говорит о диагнозе “сердечно-легочная форма дирофиляриоза”, даже в том случае, если рентген и ЭХО не выявляют поражения.
Если же тест на антиген отрицательный, рентген и ЭХО не выявили признаки инвазии  — предварительный диагноз — “кожная форма дирофиляриоза”. В такой ситуации для исключения заражения D.Immitis рекомендуется повторить исследование на антиген, хотя это и не является строго обязательным. Для повторного тестирования используют тест-системы другого формата (например иммунохроматографический тест после ELISA), если нет возможности использовать тест другого формата — повторяют анализ тест-системой другого производителя. Как вариант, можно провести повторное тестирование после предварительной термообработки сыворотки (см. выше). При получении двух отрицательных результатов тестирования собаке назначают лечение кожной формы дирофиляриоза, через 6 месяцев исследование на антиген D.Immitis повторяют.

Рутинные лабораторные исследования

Специальные исследования

Рентгенография грудной клетки
Изменения на рентгенограммах наблюдаются у 85% заражённых собак. Эти изменения вариабельны  и могут развиваться уже через три месяца после начала инвазии, когда мигрирующие личинки достигают легочных артерий. Поражение артерий и паренхимы лёгких может сохраняться в течение длительного времени после окончания инвазии, вследствие естественной гибели гельминтов или вследствие лечения. В связи с этим  у части животных с тяжёлой симптоматикой и выраженными изменениями на рентгенограммах  может наблюдаться непропорционально низкий уровень антигенемии, или она вообще может отсутствовать на то время, когда собаке сделали тест. Собаки с низким уровнем физической активности, даже при большом количестве паразитов, могут оставаться  асимптоматичными и иметь минимальные рентгенологические нарушения.

Наиболее типичное изменение на рентгенограммах — локальное поражение периферических лёгочных артерий, их увеличение, уплотнение, деформация, особенно в каудальных долях лёгких, встречается  так называемый «эффект обрезки». Эти изменения могут сопровождаться поражением лёгочной паренхимы различной степени тяжести, за счёт ЭП и ТЭЛА. Иногда, как одно из проявлений ТЭЛА, может наблюдаться локальное обеднение лёгочного сосудистого рисунка. Вовлечение крупных ветвей легочных артерий и выпячивание главной легочной артерии (ЛА)  на рентегенограмме в прямой проекции  — признаки тяжёлой инвазии и хронического течения дирофиляриоза. При тяжёлой инвазии, в конечном счёте, появляется выраженное расширение правых отделов сердца, могут выявляться признаки правожелудочковой сердечной недостаточности — гепатомегалия, гидроторакс, асцит. Характерные изменения легочных артерий (фото 1, фото 2), считают патогномоничным признаком дирофиляриоза.

Фото 1  Рентгенограмма собаки в боковой проекции, при хроническом дирофиляриозе. Кардиомегалия, признаки увеличения правых отделов сердца, выраженное расширение, уплотнение и деформация стенок главных и каудальных долевых легочных артерий.

Фото 2  Рентгенограмма собаки в прямой проекции, при хроническом дирофиляриозе. Выпячивание главной ЛА, асимметричное расширение, уплотнение, деформация легочных артерий каудальных долей.

Фото 3  Тяжёлый эозинофильный пневмонит                                   

Эозинофильный превмонит на рентгенограммах проявляется в виде одиночных или множественных включений с нечёткими контурами, различного размера и плотности (фото 3). Как правило, эти включения интерстициальные, реже — альвеолярные.

 Фото 4  Альвеолярное включение у собаки с дирофиляриозом

Альвеолярные инфильтраты у пациентов с дирофиляриозом – типичное проявление ТЭЛА. В наиболее тяжёлых случаях определятся консолидация одной или нескольких долей лёгкого (массивные сливающиеся инфильтраты). Наиболее часто такие изменения развиваются в каудальных долях и сопровождаются характерным поражением артерий.

На фото 5 и 6 представлены наиболее ранние рентгенографические признаки инвазии.

Фото 5  Локальное сосудистое включение в каудальной доле лёгкого

Фото 6  Усиление рисунка каудальных долевых легочных артерий. Справа — увеличенный фрагмент рентгенограммы. (На рентгенограммах в прямой проекции долевые легочные артерии расположены латеральнее легочных вен. На данной рентгенограмме диаметр артерии примерно в два раза больше диаметра вены, плотность артерии выше плотности вены).

Эхокардиография
В просвете легочных артерий или правого предсердия в ряде случаев могут визуализироваться взрослые особи дирофилярий, это является патогномоничным признаком инвазии. В тех регионах, где инвазия D.Immitis встречается часто, на ЭХО часто выявляется выраженное изолированное расширение правых отделов сердца и гипертензия полых вен. Может выявляться лёгочная гипертензия, выраженное расширение ствола ЛА и главных легочных артерий. У части животных визуализируются включения на трикуспидальном клапане, тромбы в легочной артерии и правом предсердии.

Фото 7  Модифицированный правый парестернальный доступ по длинной оси левого желудочка. Выраженное расширение правого предсердия и желудочка, взрослые особи дирофилярий визуализируются в виде двойных параллельных гиперэхогенных линий, заполняющих просвет правого предсердия.

Фото 8  Правый парастернальный доступ по короткой оси левого желудочка на уровне легочной артерии. Выраженное расширение ствола ЛА, в правой легочной артерии лоцируются взрослые особи дирофилярий.